NuSmart®核酸直接釋放技術和標準核酸提取技術差別
基因組DNA提取作為分子生物學最常規(guī)技術之一是每個實驗室研究人員最熟悉的技術。而想獲得基因組DNA只需要將核酸外的結構破壞就能夠將核酸釋放出來。常見有以下幾種方法，包括機械力裂解、酶裂解以及化學裂解。這幾種方法的區(qū)別見下表：
方法 | 機械力裂解 | 酶裂解 | 化學裂解 |
原理 | 外力破壞細胞壁和/或細胞膜 | 消化蛋白質結構以及破壞組蛋白的纏繞 | 緩沖液體系中加入去垢劑破壞脂膜并釋放內部成分 |
優(yōu)勢 | 操作簡單、快速 | 無需機械力 | 操作簡單 無需其他設備 |
劣勢 | 多樣本時比較耗時 處理過長中產(chǎn)熱導致基因組降解 基因組容易斷裂 需要研磨設備 | 價格昂貴 耗時
| 釋放的抑制物對下游擴增有影響 不適合細胞器基因組的獲得
|
落實在產(chǎn)品上，實驗室標準核酸提取純化包括有機提取、硅膠柱離心提取、磁珠吸附提取。這幾種方法對比如下表：
方法 | 有機提取 | 硅膠柱提取 | 磁珠提取 |
原理 | 苯酚-氯仿抽提和離心進行分離和純化 | 通過機械力和/或酶裂解釋放核酸，硅膠柱與其形成靜電吸附，通過離心和鹽粒子洗滌進行分離純化 | 通過機械力和/或酶裂解釋放核酸，帶電磁珠與其吸附，在磁場作用下進行分離純化 |
樣品 | 細胞、組織、植物等 | 所有樣品類型 | 所有樣品類型 |
純度 | 中 | 高 | 高 |
通量 | 低通量 | 中通量 | 高通量 |
優(yōu)勢 | 充分裂解 價格便宜 特別適合難處理樣本 | 操作方便 產(chǎn)量和純度都高 可處理多種樣本 | 產(chǎn)量高 不會堵塞 可設備自動化操作 |
劣勢 | 使用有毒有害化學試劑 不易購買 | 容易堵塞 產(chǎn)量有上限 | 不利于微量樣本操作 |
耗時 | 30-60分鐘 | 30-60分鐘 | 30分鐘 |
通過對比發(fā)現(xiàn)以上方法操作復雜、費時費力且危險，為了解決這一問題，我們推薦NuSmart®核酸直接釋放技術。該方法只需要5分鐘，不同溫度環(huán)境下，無需重復訓練即可完成核酸直接釋放。結合下游開發(fā)試劑盒，能夠滿足常規(guī)分子生物學實驗室的需求。
方法 | （NuSmart®核酸直接釋放技術） | 標準/傳統(tǒng)核酸提取法 |
原理 | 通過試劑破壞細胞壁/膜和細胞核膜，釋放基因組DNA。特殊納米材料提高PCR靈敏度 | 通過機械力和/或酶裂解細胞釋放核酸，硅膠柱等材料與其吸附，通過離心/磁場作用進行提取純化 |
樣品 | 任何樣本類型 | 任何樣本類型 |
樣品量 | 細胞：1-103個 組織：1-2mm 植物葉片：1-4mm 微生物培養(yǎng)液：10uL | 細胞：＞106個 組織：＞10mg 植物葉片：＞100mg 微生物培養(yǎng)液：0.5-1mL |
耗時 | 5分鐘 | 30-60分鐘 |
通量 | 高通量 | 硅膠柱法：中通量 磁珠法：高通量 |
優(yōu)勢 | 對于小量和微量樣本十分友好 操作簡單，無需訓練 基因組完整性好 無酶、無有機試劑 無大型設備投入 |
操作方便 產(chǎn)量高 純度高 |
劣勢 | 基因組容易斷裂 操作步驟多、費時 需要設備 |
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