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比麗3D基質膠細胞系培養(yǎng)B-P-00002植物來源無動物成分產品特點
更新時間:2022-05-11   點擊次數(shù):682次

3D基質膠細胞系細胞培養(yǎng)套裝(不含酚紅)包含整套膠體與試劑,可3D細胞培養(yǎng)與微環(huán)境應用等;本試劑盒操作便利且可調控基質膠硬度進行多種細胞培養(yǎng)測試;高分子膠體可快速形成水凝膠(Biozellen3D細胞培養(yǎng)基質膠套裝為植物來源,無動物成分)

一、3D基質膠細胞系細胞培養(yǎng)套裝(不含酚紅)產品說明

1、貨號:B-P-00002-2、B-P-00002-4、B-P-00002-10

2、規(guī)格:2ml-kit、4ml-kit 、10ml-kit

3、儲存條件:常溫運輸,4℃保存,可保存兩年

二、3D基質膠細胞系細胞培養(yǎng)套裝(不含酚紅)產品特點

1、植物源材料,無任何動物成分;

2、胺基酸序列人源化 ;

3、可調控基質膠硬度進行多種細胞培養(yǎng);

4、3D細胞/類器官培養(yǎng)種類數(shù)量范圍更廣;

5、無人畜共通病原菌或毒素風險;

6、最為適用于醫(yī)療級生物原料;

7、高活性、高純度、可融化;

8、4度運輸、4度保存;

9、2年保存時間;

10、3D培養(yǎng)結束后基質膠可以溫和融化,并保留3D細胞/類器官結構完整性。

三、應用

•三維細胞球體培養(yǎng)試驗

•適合用于三維細胞藥物篩檢平臺

四、樣本類型

•腫瘤細胞系

五、試劑盒組分

六、使用步驟:

A.試劑制備

A基質膠:將A基質膠溶于37℃水浴槽回溫10分鐘, 確認*融解.

C緩沖溶液(1X)制備:使用前將10X C緩沖溶液用冰的無細胞培養(yǎng)液(例如: 無血清DMEM、opt-MEM) 制備成 1X C 緩沖溶液。(不要用 PBS 稀釋 C 緩沖液) .

D 緩沖溶液(1X)制備: 使用前用冷的 1x PBS 稀釋 10X D 緩沖溶液至 1X D 緩沖溶液.

B.Biozellen®3D細胞培養(yǎng)基質膠的制備

全部步驟需要在無菌環(huán)境內操作,操作步驟如下:

1. 將24孔培養(yǎng)板放置于冰上預冷。

2. 細胞計數(shù)后取 2×105~2×107 細胞與 0.5 毫升 37℃ 培養(yǎng)基均勻混合,并與0.5毫升37℃ A膠按照 1:1 等比例均勻混合,最終細胞密度105~107cells/mL。

注:請選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)溶液與條件進行試驗,貼壁細胞應在~80% 匯合度下培養(yǎng)。

3.取 20-40 微升步驟 2 含細胞的混合 A 膠溶液滴于 步驟 1 預冷的培養(yǎng)板上,膠體將于 5 分鐘內成膠。 注: 測試膠體是否成膠,可用微量吸管尖溫和的觸碰膠體表面進行確認。

4.待膠體成膠后,添加1毫升冰的1X C緩沖溶液,并蓋過步驟3 的膠溶液,固定 15 分鐘。

5.待15分鐘固定后,小心的吸取 C 緩沖溶液并置換為適合此細胞生長之培養(yǎng)基溶液。

6將含有細胞的膠于37°C 二氧化碳培養(yǎng)箱內進行7~14天的培養(yǎng),并觀察細胞球體的形成,按正常培養(yǎng)基更換頻率進行更換操作。

C、溶膠與收集細胞球體準備程序

小心的將培養(yǎng)基吸取移除,并用1X PBS進行清洗。

小心的將 1X PBS 吸取移除,并添加 1 毫升冰的D緩沖溶液,蓋過膠滴于室溫反應 5分鐘。

溫和的用1毫升移液管吸取,直到膠滴*溶解。

將含有細胞球體的溶液吸入1.5 毫升離心管,用1000 rpm的轉速離心10分鐘,移除上清液體并收集細胞球體做分析。

D、收集單顆細胞準備程序

在分離單細胞前,先按上述溶膠與收集細胞球體準備程序進行操作

1. 添加trypsin-EDTA并與收集的細胞球體于37°C混合反應。

2. 用1毫升移液管混合,直到細胞體*分解。

3. 待細胞球體*分解,加入3倍體積的1X PBS,并用1000轉的轉速進行離心10分鐘,并移除上清液體收集沉淀的單細胞做分析。

 


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