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技術(shù)服務(wù)介紹

細(xì)胞劃痕(修復(fù))法是一種簡(jiǎn)捷的測(cè)定細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)與修復(fù)能力的方法，類(lèi)似體外傷口愈合模型。在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細(xì)胞上，用微量槍頭或其他硬物在細(xì)胞生長(zhǎng)的中央?yún)^(qū)域劃線，去除中央的細(xì)胞，然后繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞至設(shè)定時(shí)間(采用無(wú)血清或低血清(<2%)排除細(xì)胞增殖的影響)，取出培養(yǎng)板，觀察周邊細(xì)胞是否生長(zhǎng)(修復(fù))至中央劃痕區(qū)，以此判斷細(xì)胞的生長(zhǎng)遷移能力。通常設(shè)定正常對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組中添加某些處理因素或藥物、外源性基因等，通過(guò)不同分組之間的細(xì)胞對(duì)于劃痕區(qū)的修復(fù)能力，判斷比較各組細(xì)胞的遷移與修復(fù)能力。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容 

1.先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻的劃?rùn)M線，大約每隔0.5~1cm一道，橫穿過(guò)孔。每孔至少穿過(guò)5條線。

2.在孔中加入約5×105個(gè)細(xì)胞，培養(yǎng)細(xì)胞至匯合度達(dá)到90%以上。

3.用槍頭比著直尺，垂直于背后的橫線劃痕。

4.PBS洗細(xì)胞3次，去除劃下的細(xì)胞，加入無(wú)血清培養(yǎng)基。

5.放入37℃5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。按0，12，24，48h時(shí)間點(diǎn)取樣，100倍鏡下拍照。如果細(xì)胞遷移(修復(fù))能力較強(qiáng)，需相應(yīng)縮短觀察時(shí)間間隔。（一般選取兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)）

客戶(hù)需知

1）、客戶(hù)需提供生長(zhǎng)狀態(tài)良好的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)條件； 

2）、客戶(hù)需準(zhǔn)確告知實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)內(nèi)容，如樣本采樣時(shí)間點(diǎn)等。

實(shí)驗(yàn)周期

20個(gè)工作日（具體實(shí)驗(yàn)周期視實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案而異）

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn) 

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